病毒研究用水系列三：如何獲得完美的核酸電泳條帶

在病毒的分子生物學(xué)研究中，電泳技術(shù)是一個重要方法，主要用于核酸、蛋白質(zhì)的分離與鑒定，使用的實驗儀器主要是電泳儀。本文，樂楓純水為大家總結(jié)了實驗中常出現(xiàn)的問題和解決方法。

一、什么是核酸電泳？

    核酸電泳是基因操作的核心技術(shù)之一，用于分離、鑒定DNA、RNA 分子混合物和純化DNA的片段。

二、核酸電泳異常條帶問題 

    核酸電泳實驗中，常常會遇到條帶模糊、拖尾、扭曲等現(xiàn)象，究其原因，除了操作不當(dāng)，電泳條件未優(yōu)化，電泳緩沖液也是重要的影響因素之一。電泳緩沖液的組成及其離子強(qiáng)度影響DNA的電泳遷移率。

 

表1 核酸電泳條帶異常的原因匯總及建議的解決方法

 

常見問題	原因	解決方法
條帶模糊	核酸降解	使用不含核酸酶的超純水配置緩沖液
	電泳緩沖液陳舊	建議經(jīng)常更換緩沖液
	有蛋白污染	使用低有機(jī)物的超純水配置緩沖液
	核酸變性	使用超純水或者緩沖液稀釋樣品
條帶黯淡	核酸濃度過低	增加上樣量
	核酸降解	使用不含核酸酶的超純水配置緩沖液
	條帶被示蹤染料掩蓋	避免使用與目的片段遷移率相同的示蹤染料
拖帶或涂抹帶	PCR體系或PCR程序不合適	優(yōu)化PCR體系和PCR程序
條帶扭曲	配膠緩沖液和電泳緩沖液不同	配膠和電泳中使用同一批緩沖液
	電泳時電壓過高	控制電泳時電壓不超過6V/CM

三、核酸電泳用純水要求

    為了防止水中雜質(zhì)（如：核酸酶、蛋白質(zhì)、離子等）對電泳結(jié)果的影響，核酸電泳實驗配置緩沖溶液或稀釋樣品需要使用超純水：

● 電阻率 18.2 MΩ·cm

●TOC < 10 ppb

● 無核酸酶

● 細(xì)菌總數(shù)< 1 CFU/mL

● 熱原< 0.005 EU/mL

● 0.22 μm 或更低的顆粒過濾

四、核酸電泳用純水機(jī)推薦

    樂楓生物新一代Genie系列智能純水系統(tǒng)是一款專注于解決用戶需求的實驗室純水機(jī)。Genie系列智能純水系統(tǒng)采用樂楓的理念——無線連接、“1+N”模式，具有系統(tǒng)智能化、設(shè)計人性化、水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)化三大特色。

廣州某疾控中心安裝的Genie G以自來水為進(jìn)水產(chǎn)EDI純水和超純水

荷蘭安裝的Genie U以自來水為進(jìn)水產(chǎn)RO純水和超純水

穩(wěn)定可靠的水質(zhì)

• 集合優(yōu)化的流路設(shè)計的 EDI 模塊和樂楓LeFil 和OrganeFil 配方填料的超純化柱，純水和超純水水質(zhì)達(dá)到或超過相關(guān)實驗室用水標(biāo)準(zhǔn)；

• 配備RephiBio 終端過濾器，可有效去除水中的熱原（內(nèi)毒素）、核酸酶、細(xì)菌等雜質(zhì)，滿足核酸電泳實驗用水要求。

用戶體驗

• 觸控屏采用高靈敏度防水屏幕，可帶乳膠手套操作

• 采用智能IT技術(shù)，取水手柄與主機(jī)可無線連接，取水點與主機(jī)的距離不受電線長度的限制，讓您享受“無線 · 自由”的用水體驗；

• 遠(yuǎn)程取水終端的手柄設(shè)計符合人體工學(xué)，升降只手操作；亦可實時查看水質(zhì)信息，完成手動取水或定量取水等操作

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